Nature.com'u ziyaret ettiğiniz için teşekkür ederiz.Kullanmakta olduğunuz tarayıcı sürümü sınırlı CSS desteğine sahiptir.En iyi deneyim için güncellenmiş bir tarayıcı kullanmanızı (veya Internet Explorer'da Uyumluluk Modunu devre dışı bırakmanızı) öneririz.Bu arada, sürekli destek sağlamak için siteyi stiller ve JavaScript olmadan yapacağız.
Farelerdeki metabolik çalışmaların çoğu oda sıcaklığında gerçekleştirilir, ancak bu koşullar altında insanlardan farklı olarak fareler iç sıcaklığı korumak için çok fazla enerji harcar.Burada, sırasıyla chow chow veya %45 yüksek yağlı diyetle beslenen C57BL/6J farelerinde normal ağırlık ve diyete bağlı obeziteyi (DIO) açıklıyoruz.Fareler 33 gün boyunca 22, 25, 27.5 ve 30°C'de dolaylı bir kalorimetri sistemine yerleştirildi.Enerji harcamasının her iki fare modelinde de 30°C'den 22°C'ye doğrusal olarak arttığını ve 22°C'de yaklaşık %30 daha yüksek olduğunu gösteriyoruz.Normal kilolu farelerde, gıda alımı EE'ye karşı koydu.Tersine, DIO fareleri, EE azaldığında gıda alımını azaltmadı.Bu nedenle, çalışmanın sonunda, 30°C'deki fareler, 22°C'deki farelerden daha yüksek vücut ağırlığına, yağ kütlesine ve plazma gliserol ve trigliseritlerine sahipti.DIO farelerindeki dengesizlik, artan zevke dayalı diyetten kaynaklanıyor olabilir.
Fare, insan fizyolojisi ve patofizyolojisi araştırmalarında en sık kullanılan hayvan modelidir ve genellikle ilaç keşfi ve geliştirmenin ilk aşamalarında kullanılan varsayılan hayvandır.Bununla birlikte, fareler insanlardan birkaç önemli fizyolojik yönden farklıdır ve allometrik ölçeklendirme bir dereceye kadar insanlara tercüme etmek için kullanılabilirken, fareler ve insanlar arasındaki büyük farklar termoregülasyon ve enerji homeostazında yatmaktadır.Bu, temel bir tutarsızlığı göstermektedir.Yetişkin farelerin ortalama vücut kütlesi, yetişkinlerinkinden en az bin kat daha azdır (50 g'a karşı 50 kg) ve Mee tarafından açıklanan doğrusal olmayan geometrik dönüşüm nedeniyle yüzey alanının kütleye oranı yaklaşık 400 kat farklılık gösterir. .Denklem 2. Sonuç olarak, fareler hacimlerine göre önemli ölçüde daha fazla ısı kaybederler, bu nedenle sıcaklığa karşı daha duyarlıdırlar, hipotermiye daha yatkındırlar ve insanlardan on kat daha yüksek ortalama bazal metabolik hıza sahiptirler.Standart oda sıcaklığında (~22°C), farelerin çekirdek vücut sıcaklığını korumak için toplam enerji harcamalarını (EE) yaklaşık %30 artırmaları gerekir.Daha düşük sıcaklıklarda EE, 22°C'deki EE'ye kıyasla 15 ve 7°C'de yaklaşık %50 ve %100 daha fazla artar.Bu nedenle, standart barınak koşulları, modern toplumlarda yaşayan insanlar zamanlarının çoğunu termo-nötr koşullarda geçirdiklerinden (çünkü daha düşük alan oranımız, yüzeyler/hacim bizi daha az duyarlı hale getirdiğinden) fare sonuçlarının insanlara aktarılabilirliğini tehlikeye atabilecek bir soğuk stresi tepkisine neden olur. sıcaklık, etrafımızda termonötral bir bölge (TNZ) oluşturduğumuzdan. Bazal metabolizma hızının üzerinde EE) ~19 ila 30°C6 aralığındadır, farelerde ise yalnızca 2–4°C'yi kapsayan daha yüksek ve daha dar bir bant vardır7,8 Aslında, bu önemli yönü son yıllarda büyük ilgi görmüştür4, 7,8,9,10,11,12 ve bazı “tür farklılıklarının” artan kabuk sıcaklığıyla azaltılabileceği öne sürülmüştür 9. Ancak, sıcaklık aralığı konusunda fikir birliği yoktur. bu, farelerde termonötralite oluşturur.Bu nedenle, tek dizli farelerde termonötral aralıktaki alt kritik sıcaklığın 25°C'ye mi yoksa 30°C'ye mi yakın olduğu4, 7, 8, 10, 12 tartışmalı olmaya devam etmektedir.Enerji Verimliliği ve diğer metabolik parametreler saatlerle veya günlerle sınırlandırılmıştır, bu nedenle farklı sıcaklıklara uzun süre maruz kalmanın vücut ağırlığı gibi metabolik parametreleri ne ölçüde etkileyebileceği belirsizdir.tüketim, substrat kullanımı, glikoz toleransı ve plazma lipid ve glikoz konsantrasyonları ve iştah düzenleyici hormonlar.Ek olarak, diyetin bu parametreleri ne ölçüde etkileyebileceğini belirlemek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır (yüksek yağlı bir diyetle beslenen DIO fareleri, zevke dayalı (hedonik) bir diyete daha fazla yönelebilir).Bu konu hakkında daha fazla bilgi sağlamak için, yetiştirme sıcaklığının yukarıda bahsedilen metabolik parametreler üzerindeki etkisini normal ağırlıktaki yetişkin erkek farelerde ve %45 yüksek yağlı diyetle beslenen diyete bağlı obez (DIO) erkek farelerde inceledik.Fareler en az üç hafta 22, 25, 27.5 veya 30°C'de tutuldu.22°C'nin altındaki sıcaklıklar çalışılmamıştır çünkü standart hayvan barınağı nadiren oda sıcaklığının altındadır.Normal ağırlıktaki ve tek daireli DIO farelerinin, muhafaza sıcaklığındaki değişikliklere EE açısından ve muhafaza koşullarından bağımsız olarak (barınak/yuva malzemesi olsun ya da olmasın) benzer şekilde tepki verdiğini bulduk.Bununla birlikte, normal kilolu fareler, yiyecek alımını EE'ye göre ayarlarken, DIO farelerinin yiyecek alımı, EE'den büyük ölçüde bağımsızdı ve farelerin daha fazla kilo almasına neden oldu.Vücut ağırlığı verilerine göre, lipitlerin ve keton cisimlerinin plazma konsantrasyonları, 30°C'deki DIO farelerinin 22°C'deki farelerden daha pozitif bir enerji dengesine sahip olduğunu gösterdi.Normal ağırlık ve DIO fareleri arasındaki enerji alımı ve EE dengesindeki farklılıkların altında yatan nedenler daha fazla çalışma gerektirir, ancak DIO farelerindeki patofizyolojik değişiklikler ve obez bir diyetin sonucu olarak zevke dayalı diyetin etkisi ile ilgili olabilir.
EE, 30°C'den 22°C'ye doğrusal olarak arttı ve 30°C'ye kıyasla 22°C'de yaklaşık %30 daha yüksekti (Şekil 1a,b).Solunum değişim oranı (RER) sıcaklıktan bağımsızdı (Şekil 1c, d).Yiyecek alımı EE dinamikleri ile tutarlıydı ve azalan sıcaklıkla arttı (ayrıca 22°C'de 30°C'ye kıyasla ~%30 daha yüksek (Şekil 1e,f). Su alımı. Hacim ve aktivite seviyesi sıcaklığa bağlı değildi (Şekil. 1g ).-to).
Erkek fareler (C57BL/6J, 20 haftalık, ayrı muhafaza, n=7), çalışmanın başlamasından bir hafta önce 22°C'de metabolik kafeslerde barındırıldı.Arka plan verilerinin toplanmasından iki gün sonra, sıcaklık her gün saat 06:00'da (ışık fazının başlangıcı) 2°C'lik artışlarla yükseltildi.Veriler ortalama ± ortalamanın standart hatası olarak sunulur ve karanlık faz (18:00–06:00 s) gri bir kutu ile temsil edilir.a Enerji harcaması (kcal/h), b Çeşitli sıcaklıklarda toplam enerji harcaması (kcal/24 h), c Solunum değişim oranı (VCO2/VO2: 0,7–1,0), d Aydınlık ve karanlıkta ortalama RER (VCO2 /VO2) fazı (sıfır değeri 0,7 olarak tanımlanır).e kümülatif gıda alımı (g), f 24s toplam gıda alımı, g 24s toplam su alımı (ml), h 24s toplam su alımı, i kümülatif aktivite seviyesi (m) ve j toplam aktivite seviyesi (m/24s).).Fareler belirtilen sıcaklıkta 48 saat tutuldu.24, 26, 28 ve 30°C için gösterilen veriler, her döngünün son 24 saatini ifade eder.Fareler, çalışma boyunca beslenmeye devam etti.İstatistiksel anlamlılık, tek yönlü ANOVA'nın tekrarlanan ölçümleri ve ardından Tukey çoklu karşılaştırma testi ile test edildi.Yıldız işaretleri, 22°C'lik başlangıç değeri için önemi belirtir, gölgelendirme, belirtildiği gibi diğer gruplar arasındaki önemi gösterir. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001. *P <0,05, **P <0,01, **P <0,001, ****P <0,0001. *P<0.05, **P<0.01, **P<0.001, ****P<0.0001. *P < 0.05，**P < 0.01，**P < 0.001，****P < 0.0001。 *P < 0.05，**P < 0.01，**P < 0.001，****P < 0.0001。 *P <0,05, **P <0,01, **P <0,001, ****P <0,0001. *P<0.05, **P<0.01, **P<0.001, ****P<0.0001.Tüm deney süresi (0-192 saat) için ortalama değerler hesaplandı.n = 7.
Normal kilolu farelerde olduğu gibi, EE azalan sıcaklıkla doğrusal olarak arttı ve bu durumda EE, 22°C'de 30°C'ye kıyasla yaklaşık %30 daha yüksekti (Şekil 2a,b).RER farklı sıcaklıklarda değişmedi (Şekil 2c, d).Normal ağırlıktaki farelerin aksine, gıda alımı, oda sıcaklığının bir fonksiyonu olarak EE ile tutarlı değildi.Yiyecek alımı, su alımı ve aktivite seviyesi sıcaklıktan bağımsızdı (Şekil 2e-j).
Erkek (C57BL/6J, 20 hafta) DIO fareleri, çalışmanın başlamasından bir hafta önce 22°C'de metabolik kafeslerde ayrı ayrı barındırıldı.Fareler %45 HFD'yi ad libitum olarak kullanabilir.İki gün boyunca iklimlendirmeden sonra temel veriler toplandı.Ardından, sıcaklık her gün saat 06:00'da (hafif fazın başlangıcı) 2°C'lik artışlarla artırıldı.Veriler ortalama ± ortalamanın standart hatası olarak sunulur ve karanlık faz (18:00–06:00 s) gri bir kutu ile temsil edilir.a Enerji harcaması (kcal/h), b Çeşitli sıcaklıklarda toplam enerji harcaması (kcal/24 h), c Solunum değişim oranı (VCO2/VO2: 0,7–1,0), d Aydınlık ve karanlıkta ortalama RER (VCO2 /VO2) fazı (sıfır değeri 0,7 olarak tanımlanır).e kümülatif gıda alımı (g), f 24s toplam gıda alımı, g 24s toplam su alımı (ml), h 24s toplam su alımı, i kümülatif aktivite seviyesi (m) ve j toplam aktivite seviyesi (m/24s).).Fareler belirtilen sıcaklıkta 48 saat tutuldu.24, 26, 28 ve 30°C için gösterilen veriler, her döngünün son 24 saatini ifade eder.Fareler, çalışmanın sonuna kadar %45 HFD'de tutuldu.İstatistiksel anlamlılık, tek yönlü ANOVA'nın tekrarlanan ölçümleri ve ardından Tukey çoklu karşılaştırma testi ile test edildi.Yıldız işaretleri, 22°C'lik başlangıç değeri için önemi belirtir, gölgelendirme, belirtildiği gibi diğer gruplar arasındaki önemi gösterir. *P < 0,05, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0.05, ***P<0.001, ****P<0.0001. *P < 0.05，***P < 0.001，****P < 0.0001。 *P < 0.05，***P < 0.001，****P < 0.0001。 *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0.05, ***P<0.001, ****P<0.0001.Tüm deney süresi (0-192 saat) için ortalama değerler hesaplandı.n = 7.
Başka bir dizi deneyde, ortam sıcaklığının aynı parametreler üzerindeki etkisini inceledik, ancak bu sefer sürekli olarak belirli bir sıcaklıkta tutulan fare grupları arasında.Vücut ağırlığı, yağ ve normal vücut ağırlığının ortalama ve standart sapmasındaki istatistiksel değişiklikleri en aza indirmek için fareler dört gruba ayrıldı (Şekil 3a-c).7 günlük iklimlendirmeden sonra, 4.5 günlük EE kaydedildi.EE, hem gündüz saatlerinde hem de gece ortam sıcaklığından önemli ölçüde etkilenir (Şekil 3d) ve sıcaklık 27,5°C'den 22°C'ye düştükçe doğrusal olarak artar (Şekil 3e).Diğer gruplarla karşılaştırıldığında, 25°C grubunun RER'si bir miktar azaldı ve geri kalan gruplar arasında fark yoktu (Şekil 3f,g).EE paterni a'ya paralel gıda alımı, 30°C'ye kıyasla 22°C'de yaklaşık %30 arttı (Şekil 3h,i).Su tüketimi ve aktivite düzeyleri gruplar arasında anlamlı farklılık göstermedi (Şekil 3j,k).33 güne kadar farklı sıcaklıklara maruz kalma, gruplar arasında vücut ağırlığı, yağsız kütle ve yağ kütlesinde farklılıklara yol açmadı (Şekil 3n-s), ancak yağsız vücut kütlesinde yaklaşık %15 azalmaya neden oldu. kendi bildirdiği puanlar (Şekil 3n-s).3b, r, c)) ve yağ kütlesi 2 kattan fazla arttı (~1 g'dan 2–3 g'a, Şekil 3c, t, c).Ne yazık ki, 30°C kabininde kalibrasyon hataları var ve doğru EE ve RER verileri sağlayamıyor.
- 8 gün sonra (SABLE sistemine transferden bir gün önce) vücut ağırlığı (a), yağsız kütle (b) ve yağ kütlesi (c).d Enerji tüketimi (kcal/h).e Çeşitli sıcaklıklarda (kcal/24 saat) ortalama enerji tüketimi (0–108 saat).f Solunum değişim oranı (RER) (VCO2/VO2).g Ortalama RER (VCO2/VO2).h Toplam gıda alımı (g).i Ortalama gıda alımı (g/24 saat).j Toplam su tüketimi (ml).k Ortalama su tüketimi (ml/24 sa).l Kümülatif aktivite seviyesi (m).m Ortalama aktivite seviyesi (m/24 sa).n 18. gündeki vücut ağırlığı, o vücut ağırlığındaki değişim (-8. günden 18. güne), 18. gündeki yağsız kütle, q yağsız kütledeki değişim (-8. günden 18. güne ), r 18. gündeki yağ kütlesi ve yağ kütlesindeki değişiklik (-8 ila 18 gün).Tekrarlanan ölçümlerin istatistiksel önemi, Oneway-ANOVA ve ardından Tukey çoklu karşılaştırma testi ile test edildi. *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P <0,05, **P <0,01, ***P <0,001, ****P <0,0001. *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001, ****P<0.0001. *P < 0.05，**P < 0.01，***P < 0.001，****P < 0.0001。 *P < 0.05，**P < 0.01，***P < 0.001，****P < 0.0001。 *P <0,05, **P <0,01, ***P <0,001, ****P <0,0001. *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001, ****P<0.0001.Veriler ortalama + ortalamanın standart hatası olarak sunulur, karanlık faz (18:00-06:00 s) gri kutularla temsil edilir.Histogramlardaki noktalar tek tek fareleri temsil eder.Tüm deney süresi (0-108 saat) için ortalama değerler hesaplandı.n = 7.
Fareler, başlangıçta vücut ağırlığı, yağsız kütle ve yağ kütlesi açısından eşleştirildi (Şekil 4a-c) ve normal kilolu farelerle yapılan çalışmalarda olduğu gibi 22, 25, 27.5 ve 30°C'de tutuldu..Fare gruplarını karşılaştırırken, EE ve sıcaklık arasındaki ilişki, aynı farelerde zaman içinde sıcaklıkla benzer bir doğrusal ilişki gösterdi.Bu nedenle, 22°C'de tutulan fareler, 30°C'de tutulan farelerden yaklaşık %30 daha fazla enerji tüketmiştir (Şekil 4d, e).Hayvanlarda etkileri incelerken, sıcaklık her zaman RER'yi etkilememiştir (Şekil 4f,g).Yiyecek alımı, su alımı ve aktivite, sıcaklıktan önemli ölçüde etkilenmedi (Şekil 4h-m).33 günlük yetiştirmeden sonra, 30°C'deki fareler, 22°C'deki farelerden önemli ölçüde daha yüksek bir vücut ağırlığına sahipti (Şekil 4n).İlgili başlangıç noktalarıyla karşılaştırıldığında, 30°C'de yetiştirilen fareler, 22°C'de yetiştirilen farelere göre önemli ölçüde daha yüksek vücut ağırlıklarına sahipti (ortalama ± ortalamanın standart hatası: Şekil 4o).Nispeten daha yüksek kilo alımı, yağsız kütledeki bir artıştan (Şekil 4r, s) ziyade yağ kütlesindeki bir artıştan (Şekil 4p, q) kaynaklanıyordu.30°C'deki düşük EE değeriyle uyumlu olarak, BAT fonksiyonunu/aktivitesini artıran birkaç BAT geninin ifadesi, 22°C'ye kıyasla 30°C'de azaldı: Adra1a, Adrb3 ve Prdm16.BAT işlevini/aktivitesini artıran diğer anahtar genler de etkilenmedi: Sema3a (nörit büyüme düzenlemesi), Tfam (mitokondriyal biyogenez), Adrb1, Adra2a, Pck1 (glukoneogenez) ve Cpt1a.Şaşırtıcı bir şekilde, artan termojenik aktivite ile ilişkili Ucp1 ve Vegf-a, 30°C grubunda azalmadı.Aslında, üç faredeki Ucp1 seviyeleri 22°C grubundan daha yüksekti ve Vegf-a ve Adrb2 önemli ölçüde yükseldi.22 °C grubuyla karşılaştırıldığında, 25 °C ve 27,5 °C'de tutulan fareler hiçbir değişiklik göstermedi (Ek Şekil 1).
- 9 gün sonra (SABLE sistemine transferden bir gün önce) vücut ağırlığı (a), yağsız kütle (b) ve yağ kütlesi (c).d Enerji tüketimi (EE, kcal/h).e Çeşitli sıcaklıklarda (kcal/24 saat) ortalama enerji tüketimi (0–96 saat).f Solunum değişim oranı (RER, VCO2/VO2).g Ortalama RER (VCO2/VO2).h Toplam gıda alımı (g).i Ortalama gıda alımı (g/24 saat).j Toplam su tüketimi (ml).k Ortalama su tüketimi (ml/24 sa).l Kümülatif aktivite düzeyi (m).m Ortalama aktivite seviyesi (m/24 sa).n 23. gündeki vücut ağırlığı (g), o Vücut ağırlığındaki değişim, p Yağsız kütle, q 9. güne kıyasla 23. günde yağsız kütledeki (g) değişim, 23. günde yağ kütlesindeki (g) değişim, yağ kütle (g) 8. güne göre, 23. gün -8. güne göre.Tekrarlanan ölçümlerin istatistiksel önemi, Oneway-ANOVA ve ardından Tukey çoklu karşılaştırma testi ile test edildi. *P < 0,05, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0.05, ***P<0.001, ****P<0.0001. *P < 0.05，***P < 0.001，****P < 0.0001。 *P < 0.05，***P < 0.001，****P < 0.0001。 *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0.05, ***P<0.001, ****P<0.0001.Veriler ortalama + ortalamanın standart hatası olarak sunulur, karanlık faz (18:00-06:00 s) gri kutularla temsil edilir.Histogramlardaki noktalar tek tek fareleri temsil eder.Tüm deney süresi (0-96 saat) için ortalama değerler hesaplandı.n = 7.
İnsanlar gibi, fareler de çevreye ısı kaybını azaltmak için genellikle mikro ortamlar oluşturur.Bu ortamın EE için önemini ölçmek için EE'yi 22, 25, 27.5 ve 30°C'de, deri koruyucular ve yuvalama malzemesi olsun ya da olmasın değerlendirdik.22°C'de standart kaplamaların eklenmesi, EE'yi yaklaşık %4 oranında azaltır.Daha sonra yuvalama malzemesinin eklenmesi, EE'yi %3-4 oranında azalttı (Şekil 5a,b).Evlerin veya derilerin + yatak takımlarının eklenmesiyle RER'de, gıda alımında, su alımında veya aktivite seviyelerinde önemli bir değişiklik gözlenmedi (Şekil 5i-p).Deri ve yuvalama malzemesinin eklenmesi de EE'yi 25 ve 30°C'de önemli ölçüde azalttı, ancak yanıtlar nicel olarak daha küçüktü.27.5°C'de fark gözlenmedi.Özellikle, bu deneylerde, EE artan sıcaklıkla birlikte azaldı, bu durumda 22°C'ye kıyasla 30°C'de EE'den yaklaşık %57 daha düşük (Şekil 5c-h).Aynı analiz sadece EE'nin bazal metabolik hıza daha yakın olduğu hafif faz için yapıldı, çünkü bu durumda fareler çoğunlukla deride dinlendi ve farklı sıcaklıklarda karşılaştırılabilir etki boyutlarına neden oldu (Ek Şekil 2a-h) .
Barınaktan ve yuva malzemesinden (koyu mavi), yuvadan alınan ancak yuva malzemesi olmayan evden (açık mavi) ve yuva ve yuva malzemesinden (turuncu) alınan fareler için veriler.a, c, e ve g odaları için 22, 25, 27,5 ve 30 °C, b, d, f ve h'de enerji tüketimi (EE, kcal/h), EE (kcal/h) anlamına gelir.22°C'de barındırılan fareler için ip Verileri: i solunum hızı (RER, VCO2/VO2), j ortalama RER (VCO2/VO2), k kümülatif gıda alımı (g), l ortalama gıda alımı (g/24 sa), m toplam su alımı (mL), n ortalama su alımı EAA (mL/24s), o toplam aktivite (m), p ortalama aktivite seviyesi (m/24s).Veriler ortalama + ortalamanın standart hatası olarak sunulur, karanlık faz (18:00-06:00 s) gri kutularla temsil edilir.Histogramlardaki noktalar tek tek fareleri temsil eder.Tekrarlanan ölçümlerin istatistiksel önemi, Oneway-ANOVA ve ardından Tukey çoklu karşılaştırma testi ile test edildi. *P < 0,05, **P < 0,01. *P < 0,05, **P < 0,01. *Р<0,05, **Р<0,01. *P<0.05, **P<0.01. *P < 0.05，**P < 0.01。 *P < 0.05，**P < 0.01。 *Р<0,05, **Р<0,01. *P<0.05, **P<0.01.Tüm deney süresi (0-72 saat) için ortalama değerler hesaplandı.n = 7.
Normal kilolu farelerde (2-3 saatlik açlık), farklı sıcaklıklarda yetiştirme, TG, 3-HB, kolesterol, ALT ve AST'nin plazma konsantrasyonlarında önemli farklılıklara yol açmadı, ancak sıcaklığın bir fonksiyonu olarak HDL'ye yol açtı.Şekil 6a-e).Leptin, insülin, C-peptit ve glukagonun açlık plazma konsantrasyonları da gruplar arasında farklılık göstermedi (Şekil 6g-j).Glikoz tolerans testinin yapıldığı gün (farklı sıcaklıklarda 31 gün sonra), başlangıç kan şekeri seviyesi (5-6 saatlik açlık) yaklaşık 6.5 mM idi ve gruplar arasında fark yoktu. Oral glukoz uygulaması, tüm gruplarda kan glukoz konsantrasyonlarını önemli ölçüde artırdı, ancak hem pik konsantrasyon hem de eğrilerin altındaki artımlı alan (iAUCs) (15-120 dakika), 30 °C'de barındırılan fare grubunda daha düşüktü (bireysel zaman noktaları: P < 0,05–P < 0,0001, Şekil 6k, l) 22, 25 ve 27,5 °C'de (birbirleri arasında farklılık göstermeyen) barındırılan farelere kıyasla. Oral glukoz uygulaması, tüm gruplarda kan glukoz konsantrasyonlarını önemli ölçüde artırdı, ancak hem pik konsantrasyon hem de eğrilerin altındaki artımlı alan (iAUCs) (15-120 dakika), 30 °C'de barındırılan fare grubunda daha düşüktü (bireysel zaman noktaları: P < 0,05–P < 0,0001, Şekil 6k, l) 22, 25 ve 27,5 °C'de (birbirleri arasında farklılık göstermeyen) barındırılan farelere kıyasla. Пероральное введение глюкозы значительно повышало концентрацию глюкозы в крови во всех группах, но как пиковая концентрация, так и площадь приращения под кривыми (iAUC) (15–120 мин) были ниже в группе мышей, содержащихся при 30 °C (отдельные временные точки: P < 0,05–P < 0,0001, рис.6k, l) по сравнению с мышами, содержащимися при 22, 25 и 27,5 ° C (которые не различались сободу собой). Oral glukoz uygulaması, tüm gruplarda kan glukoz konsantrasyonlarını önemli ölçüde artırdı, ancak hem pik konsantrasyonu hem de eğrilerin altındaki artımlı alan (iAUC) (15–120 dakika), 30°C fare grubunda daha düşüktü (ayrı zaman noktaları: P < 0.05– P < 0.0001, Şekil 6k, l) 22, 25 ve 27.5 °C'de tutulan (birbirinden farklı olmayan) farelere kıyasla.口服 葡萄糖 的 给 显着 增加 了 的 血糖 浓度 ， 但 但 在 浓度 小鼠组 中 ， ， 峰值 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 低 低 低 （（（各 各 时间 时间 点 点 点 时间 时间 时间 时间 时间 时间 时间 均 均：P < 0.05–P < 0.0001，图6k，l）与饲养在22、25 和27.5°C 的小鼠（彼此之间没有差异）相比。口服 葡萄糖 的 给 显着 显着 所有组 但 在 在 在 在 在 ， 中 ， ， 浓度 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 面积 低 低 低 各 各 各 个 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 均点 点：P < 0.05–P < 0.0001，图6k，l）与饲养在22、25和27.5°C 的小鼠（彼此之间没有差异）相比。Oral glikoz uygulaması, tüm gruplarda kan glikoz konsantrasyonlarını önemli ölçüde artırdı, ancak hem pik konsantrasyon hem de eğri altındaki alan (iAUC) (15-120 dakika), 30°C ile beslenen fare grubunda (tüm zaman noktalarında) daha düşüktü.: P < 0,05–P < 0,0001, рис. : P < 0,05–P < 0,0001, Şek.6l, l) 22, 25 ve 27.5°C'de tutulan farelerle karşılaştırmalı (birbirinden fark yok).
TG, 3-HB, kolesterol, HDL, ALT, AST, FFA, gliserol, leptin, insülin, C-peptit ve glukagonun plazma konsantrasyonları, belirtilen sıcaklıkta 33 gün beslendikten sonra yetişkin erkek DIO(al) farelerde gösterilmiştir. .Kan örneklemesinden 2-3 saat önce fareler beslenmedi.İstisna, çalışmanın bitiminden iki gün önce 5-6 saat aç bırakılan ve 31 gün boyunca uygun sıcaklıkta tutulan fareler üzerinde gerçekleştirilen bir oral glukoz tolerans testiydi.Farelere 2 g/kg vücut ağırlığı verildi.Eğri verilerinin altındaki alan (L), artımlı veriler (iAUC) olarak ifade edilir.Veriler ortalama ± SEM olarak sunulur.Noktalar bireysel örnekleri temsil eder. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P <0,05, **P <0,01, **P <0,001, ****P <0,0001, n = 7. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001, n=7. *P < 0.05，**P < 0.01，**P < 0.001，****P < 0.0001，n = 7。 *P < 0.05，**P < 0.01，**P < 0.001，****P < 0.0001，n = 7。 *P <0,05, **P <0,01, **P <0,001, ****P <0,0001, n = 7. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001, n=7.
DIO farelerinde (ayrıca 2-3 saat aç), plazma kolesterol, HDL, ALT, AST ve FFA konsantrasyonları gruplar arasında farklılık göstermedi.Hem TG hem de gliserol, 22°C grubuyla karşılaştırıldığında 30°C grubunda önemli ölçüde yüksekti (Şekil 7a-h).Buna karşılık, 3-GB, 30°C'de 22°C'ye kıyasla yaklaşık %25 daha düşüktü (Şekil 7b).Bu nedenle, 22°C'de tutulan fareler, kilo alımıyla önerildiği gibi, genel bir pozitif enerji dengesine sahip olsalar da, TG, gliserol ve 3-HB'nin plazma konsantrasyonlarındaki farklılıklar, örnekleme sırasında 22°C'deki farelerin 22°C'den daha az olduğunu düşündürür. C.°C30 °C'de yetiştirilen fareler, nispeten daha enerjik olarak negatif bir durumdaydı.Bununla tutarlı olarak, ekstrakte edilebilir gliserol ve TG'nin karaciğer konsantrasyonları, ancak glikojen ve kolesterol değil, 30 ° C grubunda daha yüksekti (Ek Şekil 3a-d).Lipolizdeki sıcaklığa bağlı farklılıkların (plazma TG ve gliserol ile ölçüldüğü üzere) epididimal veya kasık yağındaki dahili değişikliklerin sonucu olup olmadığını araştırmak için çalışmanın sonunda bu depolardan adipoz dokusu çıkardık ve ex serbest yağ asidi miktarını belirledik. canlı.ve gliserol salınımı.Tüm deney gruplarında, epididimal ve kasık depolarından alınan yağ dokusu numuneleri, izoproterenol stimülasyonuna yanıt olarak gliserol ve FFA üretiminde en az iki kat artış gösterdi (Ek Şekil 4a-d).Bununla birlikte, kabuk sıcaklığının bazal veya izoproterenol ile uyarılan lipoliz üzerinde hiçbir etkisi bulunmadı.Daha yüksek vücut ağırlığı ve yağ kütlesi ile uyumlu olarak, plazma leptin seviyeleri 30°C grubunda 22°C grubuna göre önemli ölçüde daha yüksekti (Şekil 7i).Aksine, plazma insülin ve C-peptit seviyeleri sıcaklık grupları arasında farklılık göstermedi (Şekil 7k, k), ancak plazma glukagon sıcaklığa bağımlılık gösterdi, ancak bu durumda karşı gruptaki yaklaşık 22°C iki kez karşılaştırıldı 30°C'ye kadar.İTİBAREN.Grup C (Şek. 7l).FGF21, farklı sıcaklık grupları arasında farklılık göstermedi (Şekil 7m).OGTT gününde, temel kan şekeri yaklaşık 10 mM idi ve farklı sıcaklıklarda barındırılan fareler arasında farklılık göstermedi (Şekil 7n).Oral glukoz uygulaması, kan glukoz seviyelerini artırdı ve dozlamadan 15 dakika sonra tüm gruplarda yaklaşık 18 mM'lik bir konsantrasyonda zirveye ulaştı.Doz sonrası farklı zaman noktalarında (15, 30, 60, 90 ve 120 dakika) iAUC'de (15-120 dakika) ve konsantrasyonlarda anlamlı bir fark yoktu (Şekil 7n, o).
33 günlük beslenmeden sonra yetişkin erkek DIO (ao) farelerinde TG, 3-HB, kolesterol, HDL, ALT, AST, FFA, gliserol, leptin, insülin, C-peptit, glukagon ve FGF21'in plazma konsantrasyonları gösterildi.belirtilen sıcaklıkKan örneklemesinden 2-3 saat önce fareler beslenmedi.Oral glukoz tolerans testi, 5-6 saat aç bırakılan ve 31 gün uygun sıcaklıkta tutulan farelerde çalışmanın bitiminden iki gün önce 2 g/kg vücut ağırlığı dozunda yapıldığından bir istisnaydı.Eğri verilerinin altındaki alan (o), artımlı veriler (iAUC) olarak gösterilir.Veriler ortalama ± SEM olarak sunulur.Noktalar bireysel örnekleri temsil eder. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P <0,05, **P <0,01, **P <0,001, ****P <0,0001, n = 7. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001, n=7. *P < 0.05，**P < 0.01，**P < 0.001，****P < 0.0001，n = 7。 *P < 0.05，**P < 0.01，**P < 0.001，****P < 0.0001，n = 7。 *P <0,05, **P <0,01, **P <0,001, ****P <0,0001, n = 7. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001, n=7.
Kemirgen verilerinin insanlara aktarılabilirliği, fizyolojik ve farmakolojik araştırmalar bağlamında gözlemlerin önemini yorumlamada merkezi bir rol oynayan karmaşık bir konudur.Ekonomik nedenlerle ve araştırmayı kolaylaştırmak için, fareler genellikle termonötral bölgelerinin altındaki oda sıcaklığında tutulur, bu da metabolik hızı artıran ve potansiyel olarak çevrilebilirliği bozan çeşitli telafi edici fizyolojik sistemlerin aktivasyonuna neden olur9.Bu nedenle, farelerin soğuğa maruz kalması, fareleri diyete bağlı obeziteye karşı dirençli hale getirebilir ve streptozotosin ile tedavi edilen farelerde insüline bağımlı olmayan glikoz taşınmasının artması nedeniyle hiperglisemiyi önleyebilir.Bununla birlikte, çeşitli ilgili sıcaklıklara (odadan termonötrale) uzun süre maruz kalmanın, normal kilolu farelerin (gıda üzerinde) ve DIO farelerinin (HFD üzerinde) farklı enerji homeostazını ve metabolik parametreleri ne ölçüde etkilediği açık değildir. EE'deki artışı gıda alımındaki artışla dengeleyebildikleri.Bu makalede sunulan çalışma, bu konuya biraz açıklık getirmeyi amaçlamaktadır.
Normal ağırlıktaki yetişkin farelerde ve erkek DIO farelerinde, EE'nin 22 ila 30°C arasındaki oda sıcaklığı ile ters orantılı olduğunu gösterdik.Böylece, 22°C'deki EE, 30°C'dekinden yaklaşık %30 daha yüksekti.her iki fare modelinde de.Bununla birlikte, normal ağırlıklı fareler ve DIO fareleri arasındaki önemli bir fark, normal ağırlıklı fareler, gıda alımını buna göre ayarlayarak daha düşük sıcaklıklarda EE ile eşleşirken, DIO farelerinin gıda alımının farklı seviyelerde değişmesidir.Çalışma sıcaklıkları benzerdi.Bir ay sonra, 30°C'de tutulan DIO fareleri, 22°C'de tutulan farelerden daha fazla vücut ağırlığı ve yağ kütlesi kazanırken, aynı sıcaklıkta ve aynı süre boyunca tutulan normal insanlar ateşe yol açmadı.vücut ağırlığındaki bağımlı fark.ağırlık fareler.Termo-nötere yakın veya oda sıcaklığındaki sıcaklıklarla karşılaştırıldığında, oda sıcaklığında büyüme, DIO veya yüksek yağlı bir diyet alan normal kilolu farelerle sonuçlandı, ancak normal ağırlıklı bir fare diyetinde değil, nispeten daha az kilo aldı.vücut.Diğer çalışmalar tarafından desteklenmektedir17,18,19,20,21 ancak tümü tarafından desteklenmemektedir22,23.
Isı kaybını azaltmak için bir mikro ortam yaratma yeteneğinin termal nötrlüğü sola kaydırdığı varsayılmaktadır8, 12. Çalışmamızda hem yuvalama malzemesinin eklenmesi hem de gizleme EE'yi azalttı ancak 28°C'ye kadar termal nötrlükle sonuçlanmadı.Bu nedenle, verilerimiz, çevresel olarak zenginleştirilmiş kümesler olsun ya da olmasın, tek dizli yetişkin farelerde termonötralitenin düşük noktasının gösterildiği gibi 26-28°C olması gerektiğini desteklemiyor8,12, ancak termonötralite gösteren diğer çalışmaları destekliyor.düşük noktalı farelerde 30°C'lik sıcaklıklar7, 10, 24. Sorunları karmaşık hale getirmek için farelerdeki termonötr noktanın, muhtemelen daha düşük kalori nedeniyle dinlenme (hafif) fazında daha düşük olduğundan, gün boyunca statik olmadığı gösterilmiştir. aktivite ve diyete bağlı termojenezin bir sonucu olarak üretim.Böylece, aydınlık fazda, termal nötrlüğün alt noktası ~29°С ve karanlık fazda ~33°С25 olur.
Sonuç olarak, ortam sıcaklığı ile toplam enerji tüketimi arasındaki ilişki, ısı yayılımı tarafından belirlenir.Bu bağlamda, yüzey alanının hacme oranı, hem ısı yayılımını (yüzey alanı) hem de ısı üretimini (hacim) etkileyen termal duyarlılığın önemli bir belirleyicisidir.Yüzey alanına ek olarak, ısı transferi de yalıtım (ısı transfer hızı) ile belirlenir.İnsanlarda yağ kütlesi, vücut kabuğunun etrafında yalıtkan bir bariyer oluşturarak ısı kaybını azaltabilir ve yağ kütlesinin farelerde ısı yalıtımı için de önemli olduğu, termonötral noktayı düşürdüğü ve sıcaklık hassasiyetini termal nötr noktanın altına düşürdüğü öne sürülmüştür. eğri eğimi).EE)12 ile karşılaştırıldığında ortam sıcaklığı.Çalışmamız, bu varsayılan ilişkiyi doğrudan değerlendirmek için tasarlanmamıştır çünkü vücut kompozisyonu verileri, enerji harcama verileri toplanmadan 9 gün önce toplanmıştır ve yağ kütlesi çalışma boyunca sabit değildir.Bununla birlikte, yağ kütlesinde en az 5 kat fark olmasına rağmen, normal ağırlık ve DIO fareleri 30°C'de 22°C'dekinden %30 daha düşük EE'ye sahip olduğundan, verilerimiz obezitenin temel yalıtım sağlaması gerektiğini desteklememektedir.faktör, en azından araştırılan sıcaklık aralığında değil.Bu, bunu keşfetmek için daha iyi tasarlanmış diğer çalışmalarla uyumludur4,24.Bu çalışmalarda, obezitenin yalıtıcı etkisi küçüktü, ancak kürkün toplam ısı yalıtımının %30-50'sini sağladığı bulundu4,24.Bununla birlikte, ölü farelerde, termal iletkenlik ölümden hemen sonra yaklaşık %450 arttı, bu da kürkün yalıtıcı etkisinin vazokonstriksiyon da dahil olmak üzere fizyolojik mekanizmaların çalışması için gerekli olduğunu düşündürüyor.Fareler ve insanlar arasındaki kürkteki tür farklılıklarına ek olarak, farelerde obezitenin zayıf yalıtım etkisi aşağıdaki hususlardan da etkilenebilir: İnsan yağ kütlesinin yalıtım faktörüne esas olarak deri altı yağ kütlesi (kalınlık)26,27 aracılık eder.Tipik olarak kemirgenlerde toplam hayvansal yağın %20'sinden azı28.Ek olarak, iyileştirilmiş ısı yalıtımının, yağ kütlesi arttıkça yüzey alanındaki kaçınılmaz artışla (ve dolayısıyla artan ısı kaybıyla) dengelendiği iddia edildiğinden, toplam yağ kütlesi, bir bireyin ısı yalıtımının yetersiz bir ölçüsü bile olmayabilir..
Normal kilolu farelerde, TG, 3-HB, kolesterol, HDL, ALT ve AST'nin açlık plazma konsantrasyonları, muhtemelen fareler aynı enerji dengesi durumunda olduklarından, yaklaşık 5 hafta boyunca çeşitli sıcaklıklarda değişmedi.ağırlık ve vücut kompozisyonu çalışmanın sonundaki ile aynıydı.Yağ kütlesindeki benzerlikle uyumlu olarak, plazma leptin düzeylerinde veya açlık insülini, C-peptit ve glukagon arasında da fark yoktu.DIO farelerinde daha fazla sinyal bulundu.22°C'deki fareler de bu durumda (kilo kazandıkça) genel bir negatif enerji dengesine sahip olmasalar da, çalışmanın sonunda, 30°C'de yetiştirilen farelere kıyasla, aşağıdaki gibi koşullarda nispeten daha fazla enerji eksikliği yaşadılar: yüksek ketonlar.vücut tarafından üretim (3-GB) ve plazmada gliserol ve TG konsantrasyonunda bir azalma.Bununla birlikte, lipolizdeki sıcaklığa bağlı farklılıklar, bu depolardan ekstrakte edilen yağdan salınan FFA ve gliserol arasında olduğu için, adipohormona duyarlı lipazın ifadesindeki değişiklikler gibi epididimal veya kasık yağındaki içsel değişikliklerin sonucu gibi görünmemektedir. gruplar birbirine benzer.Bu çalışmada sempatik tonu araştırmamış olmamıza rağmen, diğerleri bunun (kalp atış hızı ve ortalama arter basıncına dayalı olarak) farelerde ortam sıcaklığıyla doğrusal olarak ilişkili olduğunu ve 30°C'de 22°C'ye göre yaklaşık olarak daha düşük olduğunu bulmuşlardır. C Bu nedenle, sempatik tondaki sıcaklığa bağlı farklılıklar, çalışmamızda lipolizde rol oynayabilir, ancak sempatik tondaki bir artış lipolizi engellemekten çok uyardığından, diğer mekanizmalar kültürlenmiş farelerde bu azalmaya karşı koyabilir.Vücut yağının parçalanmasında potansiyel rol.Oda sıcaklığı.Ayrıca, sempatik tonusun lipoliz üzerindeki uyarıcı etkisinin bir kısmına dolaylı olarak insülin sekresyonunun güçlü inhibisyonu aracılık eder, bu da insülin takviyesinin lipoliz üzerindeki etkisini vurgular30, ancak çalışmamızda, farklı sıcaklıklarda açlık plazma insülini ve C-peptit sempatik tonu lipolizi değiştirmek için yeterli değildir.Bunun yerine, enerji durumundaki farklılıkların büyük olasılıkla DIO farelerindeki bu farklılıklara ana katkıda bulunduğunu bulduk.Normal kilolu farelerde EE ile gıda alımının daha iyi düzenlenmesine yol açan altta yatan nedenler daha fazla çalışma gerektirir.Bununla birlikte, genel olarak, gıda alımı homeostatik ve hedonik ipuçları31,32,33 tarafından kontrol edilir.İki sinyalden hangisinin niceliksel olarak daha önemli olduğu konusunda tartışmalar olsa da,31,32,33 yüksek yağlı gıdaların uzun süreli tüketiminin daha fazla zevke dayalı yeme davranışına yol açtığı iyi bilinmektedir. homeostaz..– düzenlenmiş gıda alımı34,35,36.Bu nedenle, %45 HFD ile tedavi edilen DIO farelerinin artan hedonik beslenme davranışı, bu farelerin gıda alımını EE ile dengelememesinin nedenlerinden biri olabilir.İlginç bir şekilde, sıcaklık kontrollü DIO farelerinde iştah ve kan şekeri düzenleyici hormonlardaki farklılıklar da gözlendi, ancak normal ağırlıktaki farelerde gözlenmedi.DIO farelerinde, plazma leptin seviyeleri sıcaklıkla arttı ve glukagon seviyeleri sıcaklıkla azaldı.Sıcaklığın bu farklılıkları ne ölçüde doğrudan etkileyebileceği daha fazla çalışmayı hak ediyor, ancak leptin söz konusu olduğunda, yağ kütlesi ve plazma leptini olduğundan, 22°C'de farelerde bağıl negatif enerji dengesi ve dolayısıyla daha düşük yağ kütlesi kesinlikle önemli bir rol oynadı. oldukça ilişkili37.Bununla birlikte, glukagon sinyalinin yorumlanması daha kafa karıştırıcıdır.İnsülin ile olduğu gibi, glukagon sekresyonu, sempatik tonusta bir artışla kuvvetli bir şekilde inhibe edildi, ancak en yüksek sempatik tonusun, en yüksek plazma glukagon konsantrasyonlarına sahip olan 22°C grubunda olduğu tahmin edildi.İnsülin, plazma glukagonunun başka bir güçlü düzenleyicisidir ve insülin direnci ve tip 2 diyabet, açlık ve postprandiyal hiperglukagonemi ile güçlü bir şekilde ilişkilidir 38,39 .Bununla birlikte, çalışmamızdaki DIO fareleri de insüline duyarsızdı, dolayısıyla bu, 22°C grubundaki glukagon sinyallemesindeki artıştaki ana faktör olamazdı.Karaciğer yağ içeriği aynı zamanda plazma glukagon konsantrasyonundaki artışla pozitif olarak ilişkilidir; bunun mekanizmaları sırasıyla hepatik glukagon direncini, azalan üre üretimini, artan dolaşımdaki amino asit konsantrasyonlarını ve artan amino asitle uyarılan glukagon sekresyonunu içerebilir40,41, 42.Bununla birlikte, çalışmamızda gliserol ve TG'nin ekstrakte edilebilir konsantrasyonları sıcaklık grupları arasında farklılık göstermediğinden, bu da 22°C grubundaki plazma konsantrasyonlarındaki artışta potansiyel bir faktör olamaz.Triiyodotironin (T3), genel metabolik hızda ve hipotermiye karşı metabolik savunmanın başlatılmasında kritik bir rol oynar43,44.Bu nedenle, muhtemelen merkezi aracılı mekanizmalar45,46 tarafından kontrol edilen plazma T3 konsantrasyonu, hem farelerde hem de insanlarda termo-nötr koşullardan47 daha az artar, ancak insanlardaki artış daha küçüktür ve bu farelere daha yatkındır.Bu çevreye ısı kaybı ile tutarlıdır.Mevcut çalışmada plazma T3 konsantrasyonlarını ölçmedik, ancak konsantrasyonlar 30°C grubunda daha düşük olabilir, bu da bizim (güncellenmiş Şekil 5a) ve diğerlerinin gösterdiği gibi, bu grubun plazma glukagon seviyeleri üzerindeki etkisini açıklayabilir. T3, doza bağımlı bir şekilde plazma glukagonunu arttırır.Tiroid hormonlarının karaciğerde FGF21 ekspresyonunu indüklediği bildirilmiştir.Glukagon gibi, plazma FGF21 konsantrasyonları da plazma T3 konsantrasyonları ile arttı (Ek Şekil 5b ve ref. 48), ancak çalışmamızdaki FGF21 plazma konsantrasyonları glukagon ile karşılaştırıldığında sıcaklıktan etkilenmedi.Bu tutarsızlığın altında yatan nedenler daha fazla çalışma gerektirir, ancak T3 kaynaklı FGF21 indüksiyonu, gözlemlenen T3 kaynaklı glukagon tepkisine kıyasla daha yüksek T3 maruz kalma seviyelerinde gerçekleşmelidir (Ek Şekil 5b).
HFD'nin 22°C'de yetiştirilen farelerde bozulmuş glikoz toleransı ve insülin direnci (belirteçler) ile güçlü bir şekilde ilişkili olduğu gösterilmiştir.Bununla birlikte, HFD, termonötr bir ortamda (burada 28 °C olarak tanımlanır) 19 büyütüldüğünde, bozulmuş glikoz toleransı veya insülin direnci ile ilişkili değildi.Çalışmamızda, bu ilişki DIO farelerinde tekrarlanmadı, ancak 30°C'de tutulan normal ağırlıklı fareler, glikoz toleransını önemli ölçüde iyileştirdi.Bu farkın nedeni daha fazla araştırma gerektirir, ancak çalışmamızdaki DIO farelerinin açlık plazma C-peptit konsantrasyonları ve insülin konsantrasyonları normal ağırlıklı farelerden 12-20 kat daha yüksek olan insüline dirençli olmaları gerçeğinden etkilenebilir.ve aç karnına kanda.yaklaşık 10 mM'lik (normal vücut ağırlığında yaklaşık 6 mM) glikoz konsantrasyonları; bu, glikoz toleransını iyileştirmek için termo-nötr koşullara maruz kalmanın herhangi bir potansiyel yararlı etkisi için küçük bir pencere bırakıyor gibi görünmektedir.Olası bir kafa karıştırıcı faktör, pratik nedenlerle OGTT'nin oda sıcaklığında gerçekleştirilmesidir.Bu nedenle, daha yüksek sıcaklıklarda barındırılan fareler, glikoz emilimini/klirensini etkileyebilecek hafif soğuk şok yaşadı.Ancak, farklı sıcaklık gruplarındaki benzer açlık kan şekeri konsantrasyonlarına bağlı olarak, ortam sıcaklığındaki değişiklikler sonuçları önemli ölçüde etkilememiş olabilir.
Daha önce de bahsedildiği gibi, son zamanlarda oda sıcaklığının arttırılmasının, fare verilerinin insanlara aktarılabilirliğini sorgulamaya yol açabilecek soğuk stresine karşı bazı reaksiyonları azaltabileceği vurgulanmıştır.Bununla birlikte, farelerin insan fizyolojisini taklit etmesini sağlamak için en uygun sıcaklığın ne olduğu açık değildir.Bu sorunun cevabı, çalışma alanından ve incelenen son noktadan da etkilenebilir.Diyetin karaciğer yağ birikimi, glikoz toleransı ve insülin direnci üzerindeki etkisi buna bir örnektir19.Enerji harcaması açısından, bazı araştırmacılar termonötralitenin yetiştirme için en uygun sıcaklık olduğuna inanıyorlar, çünkü insanlar çekirdek vücut sıcaklıklarını korumak için çok az ekstra enerjiye ihtiyaç duyuyorlar ve yetişkin fareler için tek kucak sıcaklığını 30°C7,10 olarak tanımlıyorlar.Diğer araştırmacılar, termonötraliteyi 26-28°C olarak buldukları ve insanların yaklaşık 3°C daha düşük olduğunu temel aldıkları için, insanların tek diz üzerinde yetişkin farelerde tipik olarak deneyimledikleri sıcaklıkla karşılaştırılabilir bir sıcaklığın 23-25°C olduğuna inanıyorlar.burada 23°C olarak tanımlanan alt kritik sıcaklıkları biraz 8,12'dir.Çalışmamız, termal nötrlüğün 26-28°C4, 7, 10, 11, 24, 25'te sağlanmadığını ve 23-25°C'nin çok düşük olduğunu belirten diğer birçok çalışma ile tutarlıdır.Farelerde oda sıcaklığı ve termonötralite ile ilgili olarak dikkate alınması gereken bir diğer önemli faktör, tek veya grup barınmadır.Çalışmamızda olduğu gibi, fareler bireysel olarak değil gruplar halinde barındırıldığında, muhtemelen hayvanların kalabalık olması nedeniyle sıcaklık duyarlılığı azaldı.Ancak, üç grup kullanıldığında oda sıcaklığı hala 25 olan LTL'nin altındaydı.Bu bağlamda belki de en önemli türler arası fark, BAT aktivitesinin hipotermiye karşı bir savunma olarak niceliksel önemidir.Bu nedenle fareler, yalnızca 5°C'de %60'ın üzerinde EE olan BAT aktivitesini artırarak daha yüksek kalori kayıplarını büyük ölçüde telafi ederken,51,52 insan BAT aktivitesinin EE'ye katkısı önemli ölçüde daha yüksek, çok daha küçüktü.Bu nedenle, BAT aktivitesini azaltmak, insan çevirisini artırmanın önemli bir yolu olabilir.BAT aktivitesinin düzenlenmesi karmaşıktır ancak genellikle adrenerjik stimülasyon, tiroid hormonları ve UCP114,54,55,56,57 ifadesinin birleşik etkileri aracılık eder.Verilerimiz, işlev/aktivasyondan sorumlu BAT genlerinin ekspresyonundaki farklılıkları saptamak için sıcaklığın 22°C'deki farelere kıyasla 27.5°C'nin üzerine çıkarılması gerektiğini göstermektedir.Ancak, 30 ve 22°C'de gruplar arasında bulunan farklılıklar, 22°C grubunda Ucp1, Adrb2 ve Vegf-a'nın aşağı regüle olması nedeniyle her zaman 22°C grubunda BAT aktivitesinde bir artışa işaret etmemiştir.Bu beklenmedik sonuçların temel nedeni henüz belirlenmemiştir.Bir olasılık, artan ekspresyonlarının, yüksek oda sıcaklığının bir sinyalini yansıtmayabileceği, bunun yerine onları çıkarıldığı gün 30°C'den 22°C'ye çıkarmanın akut bir etkisini yansıtabileceğidir (fareler bunu kalkıştan 5-10 dakika önce yaşadılar). .).
Çalışmamızın genel bir sınırlaması, sadece erkek fareler üzerinde çalışmış olmamızdır.Diğer araştırmalar, tek dizli dişi fareler daha yüksek termal iletkenlik ve daha sıkı kontrol edilen çekirdek sıcaklıkları nedeniyle sıcaklığa daha duyarlı olduklarından, cinsiyetin birincil endikasyonlarımızda önemli bir husus olabileceğini düşündürmektedir.Ek olarak, dişi fareler (HFD'de), aynı cinsiyetten daha fazla fare tüketen erkek farelere kıyasla (bu durumda 20 °C) 20 30 °C'de EE ile daha büyük bir enerji alımı ilişkisi gösterdi.Bu nedenle, dişi farelerde, subtermonetral içeriğin etkisi daha yüksektir, ancak erkek farelerdeki ile aynı modele sahiptir.Çalışmamızda, EE'yi inceleyen metabolik çalışmaların çoğunun yürütüldüğü koşullar olduğundan, tek dizli erkek farelere odaklandık.Çalışmamızın bir başka kısıtlılığı, farelerin çalışma boyunca aynı diyette olmalarıydı; bu, metabolik esneklik için oda sıcaklığının önemini incelemeyi engelledi (çeşitli makrobesin bileşimlerindeki diyet değişiklikleri için RER değişiklikleri ile ölçüldüğü gibi).20°C'de tutulan dişi ve erkek farelerde, 30°C'de tutulan ilgili farelere kıyasla.
Sonuç olarak çalışmamız, diğer çalışmalarda olduğu gibi, tur 1 normal ağırlıklı farelerin tahmin edilen 27,5°C'nin üzerinde termonötr olduğunu göstermektedir.Ek olarak, çalışmamız, obezitenin normal kilolu veya DIO'lu farelerde önemli bir yalıtkan faktör olmadığını, bunun da DIO ve normal kilolu farelerde benzer sıcaklık:EE oranlarına yol açtığını göstermektedir.Normal kilolu farelerin besin alımı EE ile tutarlıyken ve böylece tüm sıcaklık aralığında sabit bir vücut ağırlığını korurken, DIO farelerinin yiyecek alımı farklı sıcaklıklarda aynıydı ve bu da 30°C'de daha yüksek bir fare oranıyla sonuçlandı. .22°C'de daha fazla vücut ağırlığı kazandı.Genel olarak, termonötral sıcaklıkların altında yaşamanın potansiyel önemini inceleyen sistematik çalışmalar, fare ve insan çalışmaları arasında sıklıkla gözlemlenen zayıf tolere edilebilirlik nedeniyle garanti edilir.Örneğin, obezite çalışmalarında, genel olarak daha zayıf çevrilebilirlik için kısmi bir açıklama, kemirgen kilo kaybı çalışmalarının genellikle artan EE'leri nedeniyle oda sıcaklığında tutulan orta derecede soğuk stresli hayvanlar üzerinde gerçekleştirildiği gerçeğinden kaynaklanıyor olabilir.Bir kişinin beklenen vücut ağırlığına kıyasla abartılı kilo kaybı, özellikle etki mekanizması oda sıcaklığında 30°C'ye göre daha aktif ve aktif olan BAP'ın aktivitesini artırarak artan EE'ye bağlıysa.
Danimarka Hayvan Deney Kanunu (1987) ve Ulusal Sağlık Enstitüleri (Yayın No. 85-23) ve Deneysel ve Diğer Bilimsel Amaçlar için Kullanılan Omurgalıların Korunmasına İlişkin Avrupa Sözleşmesi (Avrupa Konseyi No. 123, Strasbourg) uyarınca , 1985).
Yirmi haftalık erkek C57BL/6J fareleri, Janvier Saint Berthevin Cedex, Fransa'dan alındı ve 12:12 saatlik bir ışık:karanlık döngüsünden sonra ad libitum standart yem (Altromin 1324) ve su (~22°C) verildi.oda sıcaklığı.Erkek DIO fareleri (20 hafta) aynı tedarikçiden temin edildi ve yetiştirme koşulları altında %45 yüksek yağlı bir diyete (Kat. No. D12451, Research Diet Inc., NJ, ABD) ve suya istenildiği kadar erişim verildi.Çalışmaya başlamadan bir hafta önce fareler ortama adapte edildi.Dolaylı kalorimetri sistemine transferden iki gün önce, fareler tartıldı, MRI taramasına (EchoMRITM, TX, ABD) tabi tutuldu ve vücut ağırlığı, yağ ve normal vücut ağırlığına karşılık gelen dört gruba ayrıldı.
Çalışma tasarımının grafik diyagramı Şekil 8'de gösterilmektedir. Fareler, Sable Systems Internationals'ta (Nevada, ABD) kapalı ve sıcaklık kontrollü dolaylı bir kalorimetri sistemine aktarıldı; bu sistemde yiyecek ve su kalitesi monitörleri ve kaydedilen bir Promethion BZ1 çerçevesi vardı. kiriş kırılmalarını ölçerek aktivite seviyeleri.XYZ.Fareler (n = 8), 22, 25, 27.5 veya 30°C'de yatak takımı kullanılarak, ancak barınak ve yuvalama malzemesi olmadan, 12:12 saatlik aydınlık:karanlık döngüsünde (aydınlık: 06:00– 18:00) ayrı ayrı barındırıldı. .2500ml/dak.Fareler, kayıttan 7 gün önce ortama alıştırıldı.Kayıtlar arka arkaya dört gün toplandı.Daha sonra fareler, 25, 27.5 ve 30°C'deki ilgili sıcaklıklarda 12 gün daha tutuldu ve ardından aşağıda açıklandığı gibi hücre konsantreleri eklendi.Bu arada, 22°C'de tutulan fare grupları bu sıcaklıkta iki gün daha tutuldu (yeni başlangıç verileri toplamak için) ve ardından ışık fazının başlangıcında sıcaklık gün aşırı 2°C'lik adımlarla artırıldı ( 06:00) 30 °C'ye ulaşana kadar Daha sonra sıcaklık 22 °C'ye düşürüldü ve iki gün daha veri toplandı.22°C'de iki ek kayıt gününden sonra, tüm hücrelere tüm sıcaklıklarda deriler eklendi ve ikinci gün (17. gün) ve üç gün boyunca veri toplama başladı.Bundan sonra (20. gün), ışık döngüsünün başlangıcında (06:00) tüm hücrelere yuvalama materyali (8-10 g) eklendi ve üç gün daha veriler toplandı.Böylece çalışma sonunda 22°C'de tutulan fareler 21/33 gün bu sıcaklıkta ve son 8 gün 22°C'de, diğer sıcaklıklarda tutulan fareler ise 33 gün bu sıcaklıkta tutuldu./33 gün.Çalışma süresince fareler beslendi.
Normal ağırlık ve DIO fareleri aynı çalışma prosedürlerini izledi.-9. günde, fareler tartıldı, MRI taraması yapıldı ve vücut ağırlığı ve vücut bileşimi açısından karşılaştırılabilir gruplara ayrıldı.-7. günde fareler, SABLE Systems International (Nevada, ABD) tarafından imal edilen kapalı sıcaklık kontrollü dolaylı bir kalorimetri sistemine aktarıldı.Fareler, yatak takımları ile ancak yuva veya barınak malzemeleri olmadan ayrı ayrı barındırıldı.Sıcaklık 22, 25, 27,5 veya 30 °C olarak ayarlanmıştır.Bir haftalık iklimlendirmeden sonra (-7 ila 0. günler, hayvanlar rahatsız edilmedi), ardışık dört günde veriler toplandı (0-4. günler, veriler ŞEKİL 1, 2, 5'te gösterilmiştir).Daha sonra 25, 27.5 ve 30°C'de tutulan fareler 17. güne kadar sabit koşullarda tutuldu.Aynı zamanda, 22°C grubundaki sıcaklık, gün aşırı 2°C'lik aralıklarla, ışık maruziyetinin başlangıcındaki sıcaklık döngüsü (06:00 saat) ayarlanarak artırıldı (veriler Şekil 1'de gösterilmektedir). .15. günde sıcaklık 22°C'ye düştü ve sonraki tedaviler için temel verileri sağlamak üzere iki günlük veriler toplandı.17. günde tüm farelere deriler eklendi ve 20. günde yuvalama materyali eklendi (Şekil 5).23. günde fareler tartıldı ve MRI taramasına tabi tutuldu ve ardından 24 saat yalnız bırakıldı.24. günde, fareler fotoperyodun başlangıcından itibaren (06:00) aç bırakıldı ve saat 12:00'de (6-7 saatlik açlık) OGTT (2 g/kg) aldı.Bundan sonra, fareler ilgili SABLE koşullarına geri döndürüldü ve ikinci günde (25. gün) ötenazi yapıldı.
DIO fareleri (n = 8), normal ağırlıktaki farelerle aynı protokolü izledi (yukarıda ve Şekil 8'de açıklandığı gibi).Fareler, enerji harcama deneyi boyunca %45 HFD'yi korudu.
VO2 ve VCO2'nin yanı sıra su buharı basıncı, 2.5 dakikalık bir hücre zaman sabiti ile 1 Hz frekansta kaydedildi.Yiyecek ve su alımı, yiyecek ve su kovalarının ağırlığının sürekli olarak kaydedilmesi (1 Hz) ile toplanmıştır.Kullanılan kalite monitörü 0,002 g çözünürlük bildirdi.Aktivite seviyeleri, bir 3D XYZ ışın dizisi monitörü kullanılarak kaydedildi, veriler 240 Hz dahili çözünürlükte toplandı ve 0.25 cm'lik etkili bir uzamsal çözünürlükle kat edilen toplam mesafeyi (m) ölçmek için her saniye rapor edildi.Veriler, Sable Systems Macro Interpreter v.2.41 ile işlendi, EE ve RER hesaplandı ve aykırı değerler (örn. yanlış yemek olayları) filtrelendi.Makro yorumlayıcı, her beş dakikada bir tüm parametreler için veri çıkışı verecek şekilde yapılandırılmıştır.
EE'yi düzenlemeye ek olarak, ortam sıcaklığı, glikozu metabolize eden hormonların salgılanmasını düzenleyerek, postprandiyal glikoz metabolizması da dahil olmak üzere metabolizmanın diğer yönlerini de düzenleyebilir.Bu hipotezi test etmek için, sonunda normal kilolu fareleri DIO oral glikoz yükü (2 g/kg) ile kışkırtarak bir vücut sıcaklığı çalışmasını tamamladık.Yöntemler, ek materyallerde ayrıntılı olarak açıklanmaktadır.
Çalışmanın sonunda (25. gün), fareler 2-3 saat aç bırakıldı (06:00'da başlayarak), izofluran ile anestezi uygulandı ve retroorbital venipunktur ile tamamen kanları alındı.Plazma lipitlerinin ve karaciğerdeki hormonların ve lipitlerin miktarının belirlenmesi, Ek Malzemelerde açıklanmaktadır.
Kabuk sıcaklığının yağ dokusunda lipolizi etkileyen içsel değişikliklere neden olup olmadığını araştırmak için kasık ve epididimal yağ dokusu, kanamanın son aşamasından sonra doğrudan farelerden çıkarıldı.Dokular, Ek Yöntemlerde açıklanan yeni geliştirilen ex vivo lipoliz deneyi kullanılarak işlendi.
Kahverengi yağ dokusu (BAT), çalışmanın bittiği gün toplandı ve ek yöntemlerde açıklandığı gibi işlendi.
Veriler ortalama ± SEM olarak sunulur.Grafikler GraphPad Prism 9'da (La Jolla, CA) oluşturuldu ve grafikler Adobe Illustrator'da (Adobe Systems Incorporated, San Jose, CA) düzenlendi.İstatistiksel anlamlılık GraphPad Prism'de değerlendirildi ve gerektiğinde eşleştirilmiş t-testi, tekrarlanan tek yönlü/iki yönlü ANOVA ölçümleri ve ardından Tukey'nin çoklu karşılaştırma testi veya eşleştirilmemiş tek yönlü ANOVA ve ardından Tukey'nin çoklu karşılaştırma testi ile test edildi.Verilerin Gauss dağılımı, testten önce D'Agostino-Pearson normallik testi ile doğrulandı.Örnek boyutu, açıklamanın yanı sıra "Sonuçlar" bölümünün ilgili bölümünde belirtilmiştir.Tekrar, aynı hayvan üzerinde (in vivo veya bir doku numunesi üzerinde) alınan herhangi bir ölçüm olarak tanımlanır.Veri tekrar üretilebilirliği açısından, benzer bir çalışma tasarımına sahip farklı farelerin kullanıldığı dört bağımsız çalışmada, enerji harcaması ile kasa sıcaklığı arasındaki bir ilişki gösterilmiştir.
Ayrıntılı deneysel protokoller, materyaller ve ham veriler, baş yazar Rune E. Kuhre'den makul talep üzerine temin edilebilir.Bu çalışma yeni benzersiz reaktifler, transgenik hayvan/hücre dizileri veya sıralama verileri üretmedi.
Çalışma tasarımı hakkında daha fazla bilgi için, bu makaleye bağlı Doğa Araştırma Raporu özetine bakın.
Tüm veriler bir grafik oluşturur.1-7, Science veritabanı deposunda depolanmıştır, erişim numarası: 1253.11.sciencedb.02284 veya https://doi.org/10.57760/sciencedb.02284.ESM'de gösterilen veriler, makul testlerden sonra Rune E Kuhre'ye gönderilebilir.
Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, MO ve Tang-Christensen, M. İnsan obezitesinin vekil modelleri olarak laboratuvar hayvanları. Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, MO ve Tang-Christensen, M. İnsan obezitesinin vekil modelleri olarak laboratuvar hayvanları.Nilsson K, Raun K, Yang FF, Larsen MO.ve Tang-Christensen M. Laboratuar hayvanları, insan obezitesinin vekil modelleri olarak. Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, MO & Tang-Christensen, M. Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, MO & Tang-Christensen, M. İnsanlar için bir ikame modeli olarak deney hayvanları.Nilsson K, Raun K, Yang FF, Larsen MO.ve Tang-Christensen M. Laboratuvar hayvanları, insanlarda obezitenin vekil modelleri olarak.Açta Eczacılık.suç 33, 173–181 (2012).
Gilpin, DA Yeni Mie sabitinin hesaplanması ve yanık boyutunun deneysel olarak belirlenmesi.Yanıklar 22, 607–611 (1996).
Gordon, SJ Fare termoregülasyon sistemi: biyomedikal verilerin insanlara aktarılması üzerindeki etkileri.fizyoloji.Davranış.179, 55-66 (2017).
Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Obezitenin yalıtım etkisi yok. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Obezitenin yalıtım etkisi yok.Fischer AW, Chikash RI, von Essen G., Cannon B. ve Nedergaard J. Obezitenin izolasyon etkisi yok. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Obezitenin izolasyon etkisi yoktur.Evet.J. Fizyoloji.endokrin.metabolizma.311, E202–E213 (2016).
Lee, P. ve ark.Sıcaklığa uyarlanmış kahverengi yağ dokusu, insülin duyarlılığını modüle eder.Diyabet 63, 3686–3698 (2014).
Nakhon, KJ ve ark.Düşük kritik sıcaklık ve soğuğa bağlı termojenez, zayıf ve aşırı kilolu bireylerde vücut ağırlığı ve bazal metabolizma hızı ile ters orantılıydı.J. Sıcak bir şekilde.Biyoloji.69, 238–248 (2017).
Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. İnsanların termal ortamını taklit etmek için fareler için en uygun yuva sıcaklıkları: Deneysel bir çalışma. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. İnsanların termal ortamını taklit etmek için fareler için en uygun yuva sıcaklıkları: Deneysel bir çalışma.Fischer, AW, Cannon, B. ve Nedergaard, J. İnsan termal ortamını taklit etmek için fareler için en uygun ev sıcaklıkları: Deneysel bir çalışma. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J.Fisher AW, Cannon B. ve Nedergaard J. İnsan termal ortamını simüle eden fareler için optimum barınak sıcaklığı: Deneysel bir çalışma.Moore.metabolizma.7, 161–170 (2018).
Keijer, J., Li, M. & Speakman, JR Fare deneylerini insanlara çevirmek için en iyi muhafaza sıcaklığı nedir? Keijer, J., Li, M. & Speakman, JR Fare deneylerini insanlara çevirmek için en iyi muhafaza sıcaklığı nedir?Keyer J, Lee M ve Speakman JR Fare deneylerini insanlara aktarmak için en iyi oda sıcaklığı nedir? Keijer, J., Li, M. & Speakman, JR Keijer, J., Li, M. & Speakman, JRKeyer J, Lee M ve Speakman JR Fare deneylerini insanlara aktarmak için en uygun kabuk sıcaklığı nedir?Moore.metabolizma.25, 168–176 (2019).
Seeley, RJ & MacDougald, OA İnsan fizyolojisi için deneysel modeller olarak Fareler: konut sıcaklığında birkaç derece önemli olduğunda. Seeley, RJ & MacDougald, OA İnsan fizyolojisi için deneysel modeller olarak Fareler: konut sıcaklığında birkaç derece önemli olduğunda. Seeley, RJ & MacDougald, OA En iyi modellerden biri de şuydu; Seeley, RJ & MacDougald, OA İnsan fizyolojisi için deneysel modeller olarak Fareler: Bir konutta birkaç derece fark yarattığında. Seeley, RJ & MacDougald, OA 小鼠作为人类生理学的实验模型：当几度的住房温度很重要时。. Seeley, RJ ve MacDougald, OA Мыши Seeley, RJ & MacDougald, OA, şu ana kadarki en iyi eğitim modelidir: когда несколько градусов температуры в поменщении. Seeley, RJ & MacDougald, İnsan fizyolojisinin deneysel bir modeli olarak OA fareleri: birkaç derecelik oda sıcaklığı önemli olduğunda.Ulusal metabolizma.3, 443–445 (2021).
Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. "Fare deneylerini insanlara aktarmak için en iyi muhafaza sıcaklığı nedir?" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. "Fare deneylerini insanlara aktarmak için en iyi muhafaza sıcaklığı nedir?" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. "Fare deneylerini insanlara aktarmak için en iyi oda sıcaklığı nedir?" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J.Fisher AW, Cannon B. ve Nedergaard J. "Fare deneylerini insanlara aktarmak için en uygun kabuk sıcaklığı nedir?"Evet: termonötr.Moore.metabolizma.26, 1-3 (2019).
Gönderim zamanı: Ekim-28-2022